029-86181351 (動物保健)
由于產品有效成分不同,其含量檢測的也會采取不同方法,有簿層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、氣相色譜法(GC)、滴定法、重量法、分光光度法(包括紫外-可見分光光度法、紅外分光光度法、原子吸收分光光度法等)、質譜法等。
一:分光光度法
紫外-可見光分光光度計
1、原理:是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析的方法。
2、分類:
(1)對照品比較法
按各品種項下的方法,分別配制供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規(guī)定量的100%±10%,所用溶劑也應完全一致,在規(guī)定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后,按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶
CX=(AX/AR)CR
式中 CX為供試品溶液的濃度;
AX為供試品溶液的吸光度;
CR為對照品溶液的濃度;
AR為對照品溶液的吸光度。
(2)吸收系數法
按各品種項下的方法配制供試品溶液,在規(guī)定的波長處測定其吸光度,再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時,吸收系數通常應大于100,并注意儀器的校正和檢定。
(3)比色法
供試品溶液加入適量顯色劑后測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。
用比色法測定時,應取數份梯度量的對照品溶液,用溶劑補充至同一體積,顯色后,以相應試劑為空白,在各品種規(guī)定的波長處測定各份溶液的吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標繪制標準曲線,再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度,并求出其含量。
也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作,顯色后,以相應的試劑為空白,在各品種規(guī)定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度,按上述(1)法計算供試品溶液的濃度。
除另有規(guī)定外,比色法所用空白系指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液,然后依次加入等量的相應試劑,并用同樣方法處理制得。
二:液相色譜法
高效液相色譜儀
1、原理:儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內, 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數, 在兩相中作相對運動時, 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來,然后根據圖譜中目標物質信號的大小來對產品濃度進行定性和定量分析。目前應用*多的是高效液相色譜法。
2、分類:
(1)內標準法
取標準被測成分,按依次增加或減少的已知階段量,各自分別加入各單體所規(guī)定的定量內標準物質中,調制標準溶液。分別取此標準液的一定量注入色譜柱,根據色譜圖取標準被測成分的峰面積和峰高和內標物質的峰面積和峰高的比例為縱坐標,取標準被測成分量和內標物質量之比,或標準被測成分量為橫坐標,制成標準曲線。然后按單體中所規(guī)定的方法調制試樣液。在調制試樣液時,預先加入與調制標準液時等量的內標物質。然后按制作標準曲線時的同樣條件下得出的色譜,求出被測成分的峰面積或峰高和內標物質的峰積或峰高之比,再按標準曲線求出被測成分的含量。
(2)標準曲線法:
取標準被測成分按依次增加或減少階段法,各自調制成標準液,注入一定量后,按色譜圖取標準被測成分的峰面積或峰高為縱坐標,而以標準被測成分的含量為橫坐標,制成標準曲線。然后按單體中所規(guī)定的方法制備試樣液。取試樣液按制標準曲線時相同的條件作出色譜,求出被測成分的峰面積和峰高,再按標準曲線求出被測成分的含量。
(3)對照品比較法:
按規(guī)定方法,分別配制供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規(guī)定量的100%±10%,所用溶劑也應完全一致,在規(guī)定的色譜條件下分別做出色譜,得出被測成分的峰面積和峰高,按下式計算供試品中被測溶液的濃度,即可算出樣品成分含量
CX=(AX/AR)CR
式中 CX為供試品溶液的濃度;
AX為供試品溶液的峰面積或峰高;
CR為對照品溶液的濃度;
AR為對照品溶液的峰面積或峰高。
(4)峰面積百分率法
以色譜中所得各種成分的峰面積的總和為100,按各成分的峰面積總和之比,求出各成分的組成比率。
三:氣相色譜法:
1、原理:氣液色譜法是一種在有機化學中對易于揮發(fā)而不發(fā)生分解的化合物進行分離與分析的色譜技術。氣相色譜的典型用途包括測試某一特定化合物的純度與對混合物中的各組分進行分離(同時還可以測定各組分的相對含量)在某些情況下,氣相色譜還可能對化合物的表征有所幫助。
2、分類:氣相色譜分析分類和液相色譜基本相同。
此外還有滴定法、重量法、質譜分析法、液質聯用、氣質聯用等各種分析方法,在此就不一一闡述。